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羊皮中的胶原蛋白肽怎么提炼

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羊皮中的胶原蛋白肽怎么提炼

1、一种具有dpp-iv抑制活性的羊皮胶原蛋白肽,其特征在于:所述羊皮胶原蛋白肽的氨基酸序列为gly-pro-ala-gly-pro-ile-gly-pro-val。

2、根据权利要求1所述的具有dpp-iv抑制活性的羊皮胶原蛋白肽的制备方法,其特征在于:包括如下步骤:

羊皮的前处理:将脱毛羊皮物理脱脂后洗净、剪成1×1cm的羊皮粒,然后进行脱灰、脱脂及除杂蛋白处理,处理完毕后对羊皮粒进行再次清洗

羊皮胶原蛋白的提取:将经过前处理所得羊皮粒采用碱溶液浸泡,浸泡后收集羊皮粒进行脱钙、双氧水处理,羊皮粒清水冲洗后进行热解处理,所得溶液即为羊皮胶原蛋白溶液

胶原蛋白的酶水解:得到的羊皮胶原蛋白溶液的ph,加入alcalase碱性蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶进行水解,水解完毕后高温灭酶,收集上清液备用

胶原蛋白肽的制备:将酶解处理后的羊皮胶原蛋白肽上清液澄清处理,对酶解液进行dpp-iv抑制活性检测,浓缩溶液后冷冻干燥,即为具有dpp-iv抑制活性的羊皮胶原蛋白肽。

3、根据权利要求2所述的具有dpp-iv抑制活性的羊皮胶原蛋白肽的制备方法,其特征在于:所述羊皮的前处理中包括如下步骤:

原料羊皮浸水清洗:将脱毛羊皮用清水冲洗至皮料水中无砂土,浸泡并在浸泡的过程中保持换水,剪除多余脂肪,然后在搅拌的条件下清洗,并在清洗的过程中保持换水

浸泡脱灰:将清洗后的羊皮加入硫酸铵溶液,常温下搅拌浸泡并保持换溶液。脱灰后使用去离子水冲洗并调节ph至7.5

除杂蛋白:将脱灰后的羊皮加入到食盐水中,常温下搅拌浸泡并更换一次溶液,浸泡后用水洗涤干净

二次脱灰:浸泡后用水洗涤干净的羊皮粒皮块中加入到纯碱溶液中浸泡并搅动,最后沥水、水洗3次

脱脂:将洗净的羊皮粒与乙醇混合,浸泡脱脂后过滤除去乙醇,用蒸馏水清洗羊皮粒后,再将羊皮粒加入到nacl溶液中,浸泡24h后过滤,所得羊皮粒用蒸馏水清洗后备用。

4、根据权利要求2所述的具有dpp-iv抑制活性的羊皮胶原蛋白肽的制备方法,其特征在于:所述羊皮胶原蛋白的提取中包括如下步骤:

碱液浸泡:取脱脂后的羊皮粒加入到氢氧化钠溶液室温浸泡,每天搅拌3次,每天换一次相同浓度和体积的碱液。

脱钙处理:使用硫酸钠溶液浸泡碱处理后羊皮粒,室温放置24h。室温下、去离子水冲洗羊皮粒至溶液ph为7.5

双氧水处理:脱钙后的羊皮粒浸入双氧水溶液中,浸泡24h。隔一段时间后更换双氧水溶液。随后,羊皮粒用水清洗干净。

热解处理:清洗干净后的羊皮粒浸入水中,进行煮胶,升高温度保持一段时间。

5、根据权利要求2所述的具有dpp-iv抑制活性的羊皮胶原蛋白肽的制备方法,其特征在于:所述胶原蛋白的酶水解中包括如下步骤:

调节ph和温度至后续加入的蛋白酶的最适ph和温度,加入蛋白酶,酶解足够时间。将酶解后得到的酶解液升温进行灭酶。

6、根据权利要求2所述的具有dpp-iv抑制活性的羊皮胶原蛋白肽的制备方法,其特征在于:所述胶原蛋白肽的制备中包括如下步骤:

澄清过滤:以硅藻土或活性炭为吸附剂,使用砂芯漏斗(三层定量滤纸)抽滤,滤液使用离心机在高转速下离心,去上层油脂和下层沉淀,得澄清溶液

浓缩干燥:将澄清后溶液旋转蒸发,体积浓缩一半以上浓缩液经冷冻干燥后得胶原蛋白肽。

7、根据权利要求5所述的具有dpp-iv抑制活性的羊皮胶原蛋白肽的制备方法,其特征在于:所述酶水解中蛋白酶为alcalase碱性蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶。

8、根据权利要求5所述的具有dpp-iv抑制活性的羊皮胶原蛋白肽的制备方法,其特征在于:所述酶水解中蛋白酶的用量为7200~16000u。

9、根据权利要求5、7、8中任一所述的具有dpp-iv抑制活性的羊皮胶原蛋白肽的制备方法,其特征在于:所述酶水解中蛋白酶为alcalase碱性蛋白酶,所述蛋白酶的用量为9600u。

10、根据权利要求4所述的具有dpp-iv抑制活性的羊皮胶原蛋白肽的制备方法,其特征在于:所述碱液浸泡中碱的浓度为0.5mol/l。